產(chǎn)品名稱：小鼠載脂蛋白B（apo-B）ELISA試劑盒

英文名稱：Mouse apo-B ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：XFM21479

規(guī)格：48T/96T

檢測(cè)范圍：37.5 μg/mL – 1200 μg/mL

靈敏度：最-低檢測(cè)濃度小于1.0μg/mL

儲(chǔ)存條件：2-8℃

有效期：6個(gè)月

用途：本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠載脂蛋白B（apo-B）的含量。

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途。

背景介紹： 載脂蛋白B(apo-B)是一種蛋白質(zhì)，由APOB基因編碼。它是乳糜微粒、VLDL、Lp(a)、IDL和LDL顆粒的主要載脂蛋白，它負(fù)責(zé)將脂肪分子（脂質(zhì)），包括膽-固醇，在身體周圍運(yùn)送到所有組織的所有細(xì)胞。雖然它在低密度脂蛋白（和所有較大的）顆粒中的所有功能作用仍然有些不清楚，但它是顆粒的主要組織蛋白（整個(gè)復(fù)雜的外殼包裹/攜帶脂肪分子）成分，并且是形成這些顆粒的絕對(duì)需要。另外，低密度脂蛋白顆粒上的載脂蛋白充當(dāng)全身各種細(xì)胞中低密度脂蛋白受體的配體。

檢測(cè)原理：

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠載脂蛋白B（apo-B）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹-底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠載脂蛋白B（apo-B）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

4.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織-剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

注：標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

注意事項(xiàng)：

1、產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)使用，請(qǐng)勿用于食品、化妝品、臨床醫(yī)療等其它用途。

2、使用時(shí)，請(qǐng)穿戴好實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)面罩、一次性實(shí)驗(yàn)手套等，做好實(shí)驗(yàn)防護(hù)，嚴(yán)禁直接接觸。攝入有害，嚴(yán)禁入口。

3、剩余產(chǎn)品請(qǐng)勿隨意丟棄，請(qǐng)按照相關(guān)生物化學(xué)廢棄物的處理規(guī)定，進(jìn)行處理。

4、請(qǐng)按照保存要求妥善保存，使用后請(qǐng)密封避光保存。

小鼠載脂蛋白B（apo-B）ELISA試劑盒